1. 实验简介

蛋白质是生命体中一个非常重要的分子,其功能非常多样,包括结构支持、代谢调节、信息传递、免疫作用等等。因此,在生物化学实验中测定蛋白质的含量是非常重要的。

 实验简介

布拉德福法是目前蛋白质含量测定的经典方法之一,简单易做、结果稳定可靠。本实验使用布拉德福法来测定样品中的蛋白质含量。

2. 实验步骤

2.1 实验所需物品:生理盐水、布拉德福染液、牛血清白蛋白标准品、待测样品。

2.2 将10ml的生理盐水分别加入0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、2.5ml的牛血清白蛋白标准品,分别加入0.5ml的布拉德福染液,用生理盐水调整体积至5ml,充分混匀。

2.3 取待测样品,加入足量生理盐水,使其与标准品的总体积相同。分别取0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、2.5ml待测样品分别加入0.5ml的布拉德福染液,用生理盐水调整体积至5ml,充分混匀。

2.4 在537nm波长下,用分光光度计分别测定标准品和待测样品的吸光度。

3. 结果分析

根据标准曲线,可以计算出待测样品中蛋白质的含量。布拉德福法能够定量测定蛋白质的含量,这是因为蛋白质含有大量的苯环和咪唑基团,这些官能团与布拉德福染液中的氧化铜离子发生氧化-还原反应,形成着色复合物。复合物的颜色与蛋白质含量成正比,从而可以用来测定蛋白质的含量。

4. 实验注意事项

4.1 实验中所有操作应该严格按照实验步骤进行,不要出现偏差。

4.2 实验中的试剂应该严格保存,避免长时间暴露在光线下,以免对实验结果产生影响。

4.3 实验结束后应该将所有的实验用品和试剂清洗干净,做好实验室卫生。

4.4 实验过程中要严格遵守实验操作规范,注意个人安全防护。


文章TAG:bradford  测定  蛋白  蛋白质  bradford法测定蛋白质含量实验报告  
下一篇