bradford法测蛋白含量,布拉德福法测定蛋白质含量的新方法

1. 简介

蛋白质是生命体的重要组成部分，因此在生物学研究中扮演着不可替代的角色。测定蛋白质含量是生物学实验中的常见操作，布拉德福法测定蛋白质含量是其中一种较为常见、准确的方法。

传统布拉德福法使用Coomassie Brilliant Blue（简称CBB）染色剂来测定蛋白质含量。CBB能够与蛋白质中的氨基酸发生强烈的吸附作用，进而在紫外线下显色。使用已知浓度的蛋白质标准品生成标准曲线，据此推算待测样品中蛋白质含量。

在传统布拉德福法的基础上，科研工作者们不断改进和升级，提出了更为准确、敏感的方法。其中，一种常用改进的布拉德福法是使用Quick Start? Bradford Protein Assay Kit。这种试剂盒使用改进的CBB染色剂，大大提高了检测灵敏度。

制备标准品：使用已知浓度的蛋白质标准品制备4-6个不同浓度的标准品溶液。将200μl每个标准品溶液分别放入96孔板，作为标准曲线样品。

分别加入1μl到20μl需要测定的样品，补充至200μl，同时加入Bradford检测试剂。注意，不同样品浓度需要加入的试剂体积会有所不同，最好根据经验和实验数据确定最适合的加入体积。

将各样品混匀，并放入分光光度计中，在595 nm处进行光谱测定，记录各样品吸收值。

使用标准曲线计算出各样品中蛋白质的含量。

使用Quick Start? Bradford Protein Assay Kit可以显著提高测定蛋白质含量的准确度和敏感度，尤其适用于含有相对低浓度蛋白的样品。实验操作简便，具有较高的实用性。