1. 简介
Bradford蛋白浓度测定法是一种常用的蛋白质含量测定方法。该方法基于染料结合原理,通过比较待测样品与已知浓度标准曲线的吸光度差异来测量蛋白质含量。该方法与传统的Lowry蛋白质含量测定方法相比,具有操作简单、检测灵敏度高和耗时短等特点。

2. 实验操作
Bradford法蛋白质含量测定的基本步骤如下:
1. 首先准备标准曲线,将不同浓度的标准蛋白质溶液分别加入Bradford试剂中,用分光光度计测定吸光度。
2. 取待测样品,加入Bradford试剂,混匀后放置一段时间,再次用分光光度计测定吸光度。
3. 将待测样品的吸光度值与标准曲线相比较,求出样品的蛋白质含量。
3. 实验注意事项
1. 实验中Bradford试剂与蛋白质的比例要精确控制,否则会影响测定结果。
2. 分光光度计的光程要一致,否则会影响吸光度的测定。
3. 标准曲线的制备要简单、准确,通常选择含有较多蛋白质的标准蛋白质溶液,如卵清蛋白溶液等。
4. 样品的质量与浓度对测定结果有很大影响,应尽量控制样品的干扰因素。
4. 结论
通过Bradford蛋白浓度测定法可以精确测定待测样品中蛋白质的含量,该方法操作简单、结果稳定,是一种常用的蛋白质含量测定方法。因其敏感度高、测定速度快,可在分子生物学、生化和细胞生物学等领域广泛应用。
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